摘要:杂种优势利用是显著提高作物产量的主要途径，有助于解决日益增长的人口数量与有限耕地之间的矛盾。大豆作为世界上重要的粮油饲兼用作物，其开展杂种优势利用已有30余年。其中，基于细胞质雄性不育的三系法杂交育种系统是大豆杂种优势利用的主要途径。目前，已有40余个杂交大豆品种通过审定并在生产上推广应用，杂交大豆正处于由中试向产业化推进阶段。本文对大豆细胞质雄性不育遗传基础与育种应用进行了综述，系统阐述了各类型细胞质雄性不育系的发现及利用、不育性状的遗传和分子机制、育性恢复基因和恢复抑制基因的定位和克隆等方面的研究进展。基于大豆杂种优势利用研究现状论述和分析，提出了三系法杂交大豆育种中存在的问题、挑战及解决路径，并对三系法杂交大豆育种技术的创新进行了展望，旨在为大豆杂种优势分子基础和应用研究提供新方法、新思路。

摘要:灰斑病是大豆尾孢菌（Cercospora sojina K. Hara）导致的世界性大豆真菌病害，在大豆主要生产区的流行有增长趋势，给生产带来重大损失。大豆尾孢菌变异迅速，已演化出多个具有致病性差异的生理小种，导致现有品种抗性不能满足生产需求。随着分子生物技术的发展，为了获得具有广谱抗性的种质，近年来研究方向从传统的抗病育种转移到对大豆尾孢菌致病机制解析及大豆抗灰斑病基因精细定位上。本文对大豆尾孢菌生理小种的鉴定及其致病性、抗病遗传、抗病育种等方面的国内外研究进展进行了系统综述，并对未来大豆灰斑病的表型精准鉴定、致病机制解析、抗病基因精细定位和抗病育种进行了探讨，为大豆抗灰斑病的进一步研究提供参考。

摘要:大豆花叶病毒（SMV，soybean mosaic virus）病是世界大豆主产区广泛存在且普遍发生的主要病害之一，对大豆的产量和品质均可造成严重危害。本文综合分析了近年来通过遗传定位发现的大豆花叶病毒抗性基因及其紧密连锁的分子标记，探讨了分子标记在提高大豆抗病育种中的应用，总结了R_SC3（w）、R_SC14-r和R_SC18等抗大豆花叶病毒基因的物理位置及其候选基因。基于候选基因测序、实时荧光定量PCR、病毒介导基因沉默（VIGS，virus induced gene silencing）和基因编辑CRISPR/Cas9等技术梳理出GsCAD1、GmCAL和GmMLRK1等一系列直接或间接参与大豆花叶病毒抗性的相关基因，为大豆抗大豆花叶病毒基因调控网络的完善奠定了基础。本综述总结分析了大豆与大豆花叶病毒的相互作用机制，聚焦分析大豆抗性基因Rsv3等对大豆花叶病毒抗病机制研究进展，并对抗大豆花叶病毒育种的研究方向提出了展望，以期为大豆抗性基因分子标记的应用和分子调控机制的研究提供参考。

摘要:野生大豆（Glycine soja Sieb. & Zucc.）是栽培大豆（Glycine max ［L.］ Merr.）的近缘祖先种。在大豆驯化的过程中，栽培大豆丢失了大量的基因或等位变异，导致栽培大豆的遗传多样性降低，这严重限制了栽培大豆品种选育和改良的有效性与丰富性。我国野生大豆种质资源丰富，蕴藏着许多高蛋白含量、抗病虫、耐干旱、耐盐碱等方面的潜力基因，挖掘潜力基因并利用分子设计育种技术应用到现代的栽培大豆品种中，能够有效地拓宽栽培大豆的遗传多样性。本文综述了野生大豆的分布规律和形态特征、近年来在野生大豆中发掘的重要功能基因或位点，包括百粒重、开花期和成熟期、蛋白质和油分含量、抗病、抗虫、耐盐碱、耐干旱等重要农艺性状基因，并讨论这些重要基因或位点在未来栽培大豆育种中的应用潜力，以期为育种家培育和改良大豆新品种提供一种新的育种思路和策略。

摘要:MADS-box是植物体内一种重要的转录因子，其家族成员具有典型的MIKC结构、高度保守的N端MADS以及保守性较低的I域和C端。MADS-box基因广泛表达于植物的根、茎、叶、花、芽等组织部位，并参与调控花期、花器官发育、种子发育及非生物胁迫响应等过程。近年来的研究报道显示，不同MADS-box基因的表达模式不尽相同，其功能也存在较大差异。本文概述了大豆MADS-box基因家族的结构及分类，总结了大豆MADS-box基因家族花发育ABCDE模型中相关成员及SVP、SOC1、FLC等基因的研究进展。最后对大豆MADS-box的研究提出了展望，为今后进一步挖掘和利用该类转录因子基因进行大豆遗传改良和种质创新提供参考依据。

摘要:大豆作为重要的粮食作物和油料作物，在人类生产生活中扮演着十分重要的角色。近年来国内大豆供给孱弱，对外依存度过高，使国内大豆市场受到严重冲击，并给国家粮食安全带来一定隐患，因此培育优质高产的大豆品种是当前国内大豆育种的重要目标。目前，大豆中一批控制重要性状的关键基因已经被克隆和解析，为开展分子设计育种提供了重要的理论支撑。传统育种周期长、效率较低，基因编辑技术为生物育种提供了新的途径和工具，可以加速育种进程。以CRISPR/Cas9技术为代表的基因编辑技术已经快速发展成为大豆基因功能研究、改造及农艺性状遗传改良的重要工具。本文介绍了基因编辑技术的类型、特点及其在植物中的应用概况，并综述了其在大豆产量、品质、抗病、抗逆、开花期、共生固氮和育性等农艺性状研究中的最新研究进展，为开展大豆基因编辑育种提供了一定的依据和借鉴。此外，本文还探讨了基因编辑技术在大豆遗传改良中存在的问题，并对其应用前景进行了展望。

摘要:在“第三次全国农作物种质资源普查与收集行动”项目中，调查和收集了四川省大豆地方种质资源，鉴定了192份大豆种质资源的形态特征和主要农艺性状。收集的大豆种质资源来自四川省16个市（州）的41个县（区），集中分布在雅安市、乐山市、广元市、巴中市和泸州市。结果表明，大豆种质资源12个表型性状的变异系数范围在10.11%~57.62%之间，单株粒数的变异系数最大，叶绿素相对含量SPAD值的变异系数最小。相关分析结果表明，株高、茎粗、分枝数、单株荚数、单株粒数之间呈极显著正相关，百粒重与分枝数和单株荚数均呈极显著负相关。主成分分析提取到3个主成分，累计贡献率达76.29%，能够反映大豆种质资源表型性状的大部分信息。聚类分析将192份大豆种质资源划分为4个类群，分别具有高百粒重、多荚、高SPAD值和叶柄长等不同的特征，筛选出7份优异大豆种质资源。此外，四川省大豆种质资源籽粒颜色和籽粒类型丰富。本研究揭示了四川省大豆种质资源表型的遗传多样性，为高产大豆的亲本选择以及专用、特用大豆种质资源筛选提供理论依据。

摘要:盐碱地是边际土壤的主要类型之一，利用边际土地耕作是减缓耕地紧缺的有效途径。为筛选耐盐性较强的大豆种质资源，提高盐碱土地大豆产量，本研究对392份来自国内外不同地域的大豆种质资源，采用150 mmol/ L NaCl进行苗期盐胁迫处理，采用单株分类记载法进行苗期耐盐性鉴定，并利用10个与耐盐基因连锁的SSR标记对高耐及耐盐等级大豆种质资源进行分子辅助鉴定及遗传多样性分析，应用相似性系数分析、聚类分析等方法对高耐及耐盐等级大豆种质资源进行综合评价。结果表明：筛选出58份高耐及耐盐大豆种质资源，包括赤豆1号、东农69等高耐大豆种质资源14份，黑农51、黑河35等耐盐大豆种质资源44份；58份耐盐大豆种质资源分子辅助鉴定表明，绥农1号、合丰50和东大2号携带耐盐等位变异最多，均为6个，标记平均鉴定效率为43.45%，平均准确率为68.46%，其中分子标记Satt201的鉴定效率和鉴定准确率最高，分别为60.34%和96.55%；聚类分析表明，58份大豆种质资源间的相似性系数在0.5385~0.9231之间，平均值为0.6974，相关系数为0.6240，说明58份大豆种质资源大部分遗传关系较近，遗传多样性较低，58份耐盐大豆种质资源并未按地域进行聚类，但一个类群或亚群中大部分种质资源来源地在地理位置上相同或较为接近，可从中筛选亲缘关系较远的大豆种质资源作为亲本，用于培育耐盐大豆新品种奠定遗传基础。

摘要:大豆籽粒中氨基酸含量丰富，是大豆品质的重要组成部分，具有较高的营养价值和生理功能。本研究利用高效液相色谱法测定264份大豆品种干籽粒中精氨酸、甘氨酸、谷氨酸、赖氨酸等4种游离氨基酸含量。结果表明，游离氨基酸中精氨酸含量最高、谷氨酸含量次之、甘氨酸含量最低，筛选出四种游离氨基酸均高含量的3个大豆优质品种，分别为海门羊104、辽鲜豆12号、灌云大四粒。结合大豆自然群体四种游离氨基酸含量和基因型进行全基因组关联分析，大豆四种氨基酸2年均可定位到的显著SNP位点共27个，其中精氨酸有2个SNP位点，包括S17_19067780和S17_19067789，甘氨酸有19个SNP位点，包括S01_53974257、S08_38878988等，谷氨酸有1个SNP位点，S18_53291599，赖氨酸有5个SNP位点，包括S08_18555689、S08_18567542等；并推测大豆氨基酸高含量相关候选基因，精氨酸为Glyma.17G177400和Glyma.17G177600，甘氨酸为Glyma.11G157000和Glyma.11G161700，谷氨酸为Glyma.18G244200和Glyma.18G244700，赖氨酸为Glyma.08G227600和Glyma.08G228100。本研究结果为大豆品种改良、辅助大豆分子育种提供理论基础。

摘要:大豆雄性不育系对发挥大豆杂种优势具有重要价值，然而传统的三系杂交存在恢复系来源受限等问题，而环境敏感型细胞核雄性不育系在不同条件下育性可以改变。本文对ms3（Washington）、ms3（Flanagan）和ms3（Plainview）3个独立突变体的表型和突变位点展开了进一步研究，分别进行了不育表型鉴定、高通量测序、分子标记设计及突变位点验证、分析突变对MS3蛋白结构的影响、ms3（Plainview）花药半薄切片等实验。实验结果表明突变体花粉大量败育，只有零星被I₂-KI染液染成黑色的不规则花粉粒。高通量测序结果显示，ms3（Washington）和 ms3（Flanagan）在MS3第3个外显子的PHD编码区域出现了大片段插入，导致MS3蛋白PHD结构域被破坏，这个等位基因命名为ms3-1；ms3（Plainview）在MS3第1个外显子缺失了一个A，导致移码突变，开放读码框仅编码40个氨基酸，蛋白功能完全丧失，这个等位基因命名为ms3-2。半薄切片结果显示，在花药发育中后期ms3（Plainview）的绒毡层和花粉发育出现异常。综上，本研究的结果为ms3的应用和MS3基因改造提供了材料和依据。

摘要:我国盐碱地分布广、面积大，是重要的后备耕地资源、粮食增产的“潜在粮仓”。挖掘负调控大豆耐混合盐碱性的基因，通过基因敲除创制耐混合盐碱大豆新品种，是合理开发利用盐碱地，提高我国大豆产量的有效途径之一。课题组前期筛选到1个混合盐碱胁迫下调表达的基因Glyma.02g271000（GmDUF247-1）。其编码的GmDUF247-1蛋白包含1个DUF247结构域和1个跨膜结构域，利用烟草叶片瞬时表达发现GmDUF247-1-GFP融合蛋白定位在细胞膜上。荧光定量PCR显示，GmDUF247-1基因在大豆根中表达量最高，在混合盐碱处理下显著下调。为研究GmDUF247-1在大豆混合盐碱胁迫下的功能，利用大豆毛状根系统过表达GmDUF247-1基因，发现混合盐碱胁迫处理后，GmDUF247-1过表达大豆毛状根复合植株叶片萎蔫程度明显高于空载体对照，存活率、根长和株高显著低于对照。对GmDUF247-1基因在大豆自然群体中的单倍型分析发现，其启动子区有8个SNPs和4个InDels，可能导致与逆境应答和生长发育相关的转录因子识别元件序列发生改变；CDS区存在3种单倍型，GmDUF247-1^H1基因型受到了明显的人工选择。本研究初步明确了GmDUF247-1基因负调控大豆混合耐盐碱性，为系统研究GmDUF247-1基因功能和育种利用奠定了研究基础。

摘要:大豆（Glycine max （L.） Merr.）是自花授粉作物，通过人工去雄的办法生产杂交种，不仅繁琐且成本高。雄性不育基因功能的研究是大豆杂种优势利用的前提之一，大豆雄性不育位点报道较少，定位及功能研究进展缓慢。随着大豆转基因体系的成熟及生物技术的发展，利用反向遗传学研究大豆雄性不育基因的功能变得相对容易。本研究通过转录组数据分析发现大豆中编码小G蛋白的GmARFA1a受到大豆雄性育性控制基因MS1（Male Sterile 1）和MS2的调控，公共数据库数据表明GmARFA1a在大豆未开放的花中表达量最高，而qRT-PCR数据进一步明确GmARFA1a在大豆授粉前雄蕊中优势表达。花粉萌发实验及结实率统计发现Gmarfa1a突变体花粉活力下降导致结实率受到明显抑制。本研究对GmARFA1a基因功能进行了初步解析，明确其对大豆雄性育性存在一定影响。研究结果不仅丰富了对GmARFA1a乃至ARF基因家族成员功能的认识，也为后续深入研究大豆GmARFA1a功能及大豆杂种优势利用奠定了基础。

摘要:以黑农37（感）和东农L10（抗）大豆胞囊线虫3号生理小种胁迫RNA-seq数据，筛选出差异表达基因GmSBPC，对该基因编码蛋白的空间结构、蛋白理化性质、亲疏水性等进行生物信息学分析。利用抗病东农L10根系cDNA克隆GmSBPC。将含有pCAMBIA1302-GmSBPC重组载体转化至大肠杆菌DH5α、农杆菌GV3101（psoup-p19）进行亚细胞定位分析。重组pCAMBIA3300-GmSBPC转至根癌农杆菌K599进行大豆毛状根侵染。线虫土种植东农L10（抗）、东农50（感），大豆胞囊线虫胁迫处理0 d、3 d、6 d、9 d、12 d、15 d分别取根、茎、叶进行qRT-PCR分析基因表达模式。结果表明，GmSBPC蛋白编码146个氨基酸，为不溶性蛋白，α螺旋区占28.08%、延伸结构占15.75%、无规则卷曲占56.16%。亚细胞定位结果表明基因定位在细胞核中。过表达毛状根相比野生型大豆单位面积内线虫数目减少。大豆胞囊线虫胁迫下该基因在东农50和东农L10根系的表达模式为先升高后降低，整体表达水平东农L10根系＞东农50根系，东农L10根系中12 d表达量最高，该时期为线虫侵染大豆的二龄幼虫时期，因此判定该基因对线虫胁迫存在响应应答反应，推测该基因参与大豆胞囊线虫的胁迫反应。这些研究结果有助于进一步探讨SBPC基因在大豆抗胞囊线虫过程中的生理功能。

摘要:由于工业发展以及生活废弃物污染的不断加剧，作物中的重金属浓度超标，严重威胁人体的健康。铝激活苹果酸转运体编码一类阴离子通道蛋白，在植物有机酸的跨膜转运中发挥重要的作用。为研究GmALMT33基因在大豆应对镉胁迫中的功能，本研究以大豆黑农48的叶片cDNA为模板，利用RT-PCR克隆得到GmALMT33基因。该基因CDS区全长1622 bp，编码553个氨基酸，含有1个ALMT结构域。qRT-PCR结果表明，GmALMT33在大豆根部的表达水平最高；镉胁迫后，该基因表达量呈现先升高后降低的趋势。构建植物表达载体pCPB-GmALMT33并对烟草、大豆毛状根进行遗传转化，转基因植株抗逆表型与生理指标分析表明，镉（66 μmol/L CdCl₂）胁迫下，转基因烟草叶片黄化、褪绿，边缘褐化程度明显低于野生型烟草。转基因大豆毛状根复合体植株茎秆和叶脉呈现的红褐色毒害症状程度明显弱于转空载体植株。在镉胁迫处理7 d后，转基因烟草叶片的超氧化物歧化酶、抗坏血酸过氧化物酶活性及可溶性糖含量均高于野生型对照，丙二醛含量均低于对照。在镉胁迫处理0 d、1 d、3 d后，转基因大豆毛状根复合体根和叶的超氧化物歧化酶、抗坏血酸过氧化物酶活性、可溶性糖含量均高于转空载体对照，丙二醛含量均低于对照，表明GmALMT33基因提高了植株的耐镉能力。本研究为进一步探讨GmALMT33基因的作用机制提供了依据，并为大豆抗逆育种提供了新的基因。

摘要:鲜食风味是影响菜用大豆食味品质的关键因素，其形成与有机酸有着密切的关联，研究有机酸合成机制对于菜用大豆的品质改良具有重要的实际意义。本研究利用大豆毛状根系统，探究与苹果酸含量显著相关的候选基因GmALMT8、GmIF7GT5和GmAP在调控苹果酸含量方面的功能，结果表明：在GmALMT8-OE毛状根中，GmALMT8基因表达量与苹果酸的含量均显著高于空载对照毛状根，而GmIF7GT5和GmAP毛状根中苹果酸的含量无显著变化。鉴于已经报道的ALMT家族基因的苹果酸转运功能，推测大豆中GmALMT8基因可能具有相似的功能，在调控苹果酸含量方面发挥重要作用。为验证GmALMT8-OE毛状根中苹果酸含量的变化是否由GmALMT8基因表达的改变所引起，本研究采用蘸花法在拟南芥中过表达GmALMT8基因。与阳性毛状根中苹果酸测定的结果相类似，过表达GmALMT8显著提高了T₂代转基因拟南芥株系种子中的苹果酸含量，进一步证明GmALMT8的稳定表达能够提高苹果酸含量，明确GmALMT8基因在大豆中具有调控苹果酸含量的生物学功能，丰富了大豆有机酸的理论研究，对菜用大豆优质育种具有参考价值。