马铃薯抗菌肽SN1基因的克隆、原核表达及其抑菌活性
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国家重大科技专项专项课题(2008ZX08002-001)


Cloning and overexpression of defensin SN1 in Escherichia coli and its Antifungal Assay
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    摘要:

    马铃薯抗菌肽SN1是一种新型抗菌肽。为明确SN1是否抑制小麦重要土传真菌小麦纹枯菌、小麦根腐菌的生长,本文克隆了马铃薯抗菌肽基因SN1的全长编码序列,将该基因编码序列亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建成GST-SN1融合蛋白表达载体。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式表达的GST-SN1重组蛋白。经过裂解、洗涤、溶解、复性等处理,获得了纯化的GST-SN1融合蛋白。体外抑菌实验表明,SN1显著抑制小麦纹枯菌、小麦根腐菌菌丝生长,可作为上述植物病害抗性育种的潜在基因。

    Abstract:

    Potato SN1 is a new type of antimicrobial peptide. In this study,the full ORF of SN1 gene was isolated,and was sub-cloned in frame to the 3’-terminus of the ORF of Glutathione S-transferase(GST) in the prokaryotic expression vector pGEX-4T-1. This allowed the recombinant protein GST-SN1 to be highly expressed in cells of Escherichia coli. The recombinant protein GST-SN1 can be expressed in the form of inclusion bodies after induction by isopropyl-β-D- thiogalactoside. The protein GST-SN1 was solubilized, denatured, refolded, and purified. The results of antifungal assay in vitro showed that SN1 exerted obvious inhibition against the growth of phytopathogenic fungi, such as Rhizoctonia solani, and Bipolaris sorokiniana. SN1 gene may be useful for improving wheat resistances against the above pathogenic fungi.

    参考文献
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引用本文

蒋 雯,刘欣,张增艳.马铃薯抗菌肽SN1基因的克隆、原核表达及其抑菌活性[J].植物遗传资源学报,2011,12(2):286-290.

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