干种子高质量总RNA的快速提取方法
作者:
作者单位:

作者简介:

通讯作者:

中图分类号:

基金项目:

农作物基因资源安全保存评价关键技术研究(2006BAD13B10);农业部农作物种质资源保护利用项目(2130135)


A Rapid Extraction Method of High Quality Total RNA from Dry Seeds
Author:
Affiliation:

Fund Project:

  • 摘要
  • |
  • 图/表
  • |
  • 访问统计
  • |
  • 参考文献
  • |
  • 相似文献
  • |
  • 引证文献
  • |
  • 资源附件
  • |
  • 文章评论
    摘要:

    高效快速提取高质量的种子RNA是种子分子生物学研究的基础。现有的提取方法难以高效快速地从种子中得到高质量的总RNA。本试验有机地将改进SDS法和异硫氰酸胍法相结合,采用改进的酸性SDS提取液、不溶性PVPP(聚乙烯聚吡咯烷酮)阻止酚类氧化、KAc去除多糖、异丙醇沉淀RNA,可以高效地从0.01~0.1g水稻、大豆、蚕豆、芸豆、花生等干种子中提取到高质量总RNA。此法提取的总RNA,能够满足分子生物学研究的要求,可以进行反转录和RT-PCR反应,用于基因表达研究,并为从具相似成分的其他物种干种子提取总RNA提供参考方法。

    Abstract:

    Extraction of high-quality RNA is the base for seeds molecular biology research. Rapid isolation of high-quality total RNA from dry seeds is difficult by the extraction methods reported previously. In this new protocol, SDS and guanidinium thiocyanate methods were combined for RNA extraction and high-quality of total RNA was obtained in about 3.5h. Extraction at low pH, precipitation of polysaccharides with potassium acetate, usage of phenol blocker polyvinylpolypyrrolidone(PVPP) yielded high-quality RNA from rice, soybean, broad bean, kidney bean and peanut with a small number of samples of 0.01-0.1g. The extracted RNA was suitable for RNA reverse transcription and RT-PCR. This method can provide some references for isolating total RNA from dry seeds of other species with similar chemical composition.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

胡群文,陈晓玲,张志娥,等.干种子高质量总RNA的快速提取方法[J].植物遗传资源学报,2010,11(3):360-363.

复制
分享
文章指标
  • 点击次数:
  • 下载次数:
  • HTML阅读次数:
  • 引用次数:
历史
  • 收稿日期:
  • 最后修改日期:
  • 录用日期:
  • 在线发布日期:
  • 出版日期:
您是第位访问者
ICP:京ICP备09069690号-23
京ICP备09069690号-23
植物遗传资源学报 ® 2024 版权所有
技术支持:北京勤云科技发展有限公司